Klonierung der Kodierungssequenz der kleinen Einheit der Methylamin-Dehydrogenase aus Hyphomicrobium zavarzinii ZV 580

Inhaltsverzeichnis

Zusammenfassung

Summary

Abbildungsverzeichnis

Tabellenverzeichnis

Abkürzungsverzeichnis

1. Einleitung
1.1. Hyphomicrobium zavarzinii ZV580
1.2. Dehydrogenasen
1.2.1. Methylamin-Dehydrogenase
1.2.2. Anwendung
1.3. Zielsetzung

2. Material und Methoden
2.1. Materialien
2.1.1. Geräte
2.1.2. Chemikalien
2.1.3. Puffer und Lösungen
2.1.4. Medien
2.1.5. Verbrauchsmaterialien
2.1.5.1. Nukleinsäuren
2.1.5.2. Enzyme
2.1.5.3. Kits
2.1.5.4. Einmalartikel
2.1.5.5. Bakterienstämme
2.2. Methoden
2.2.1. Mikrobiologische Methoden
2.2.1.1. Kultivi erung von Escherichia coli
2.2.1.2. Cryokonservierung
2.2.1.3. Herstellung chemi sch kompetenter E. coli JM109
2.2.1.4. Kompetenztest der chemi sch kompetenten E. coli JM 109
2.2.2. Molekularbiologische Methoden
2.2.2.1. Polymerase-Ketten-Reaktion (PCR)
2.2.2.2. Aufreinigung der DNA-Fragmente
2.2.2.3. Konzentrationsbestimmung der DNA
2.2.2.4. Ligation
2.2.2.5. Transformation
2.2.2.6. Blau-Weiß-Selektion
2.2.2.7. Plasmidpräparation
2.2.2.8. Restriktionsverdau
2.2.2.9. Agarose-Gelelektrophorese
2.2.2.10. Sequenzierung

3. Ergebnisse
3.1. Polymerase-Ketten-Reaktion (PCR) und Bestimmung der Größe der PCR-Produkte mittels Agarose-Gel
3.2. Konzentrationsbestimmung der DNA
3.3. Ligation und Transformation
3.4. Blau-Weiß-Screening der transformierten Klone
3.5. Plasmidpräparation und Restriktionsverdau
3.6. Sequenzanalyse

4. Diskussion

5. Literatur

6. Anhang